The Bio-efficiency of α-amylase and protease inhibitor extracted from Saussurea costus and Rhamnus frangula l as insecticides against Tribolium castaneum (Herbst) Evaluating

Abstract

تُعدّ خنفساء الدقيق الحمراء Tribolium castaneum تهديدًا كبير ً ا على الحبوب المخز ّ نة، إذ أنها تتسبب في فقدان القيمة الغذائية والتسبّب بالتسمم الغذائي. ومع الزمن، طو ّ رت هذه الحشرة مقاومة لغالبية المبيدات ال كيميائية، مما اضطر إلى استخدام كميات كبيرة من هذه المبيدات، التي لا تضر ّ بالبيئة فحسب، بل تمثل خطراً صحّيًا على الإنسان الذي يستهلك الحبوب المعالجة. في هذه الدراسة، سعينا إلى استكشاف بدائل طبيعية ذات ضرر أقل عبر تطبيق مبادئ الإدارة المتكاملة للآفات، وذلك م ن خلال تقييم فعالية المسحوق الجاف والمستخلص المائي والزيوت العطرية لنبتتي القسط الهندي (Saussurea costus) والسدر (Rhamnus frangula) في ظروف مخبرية متكاملة ضد الحشرة البالغة. استخدمنا تراكيز متعدّدة على فترات مختلفة، ووجدنا أن أعلى معدل نفوق ( 100 ن ٪) ل 24 شرة تحقق بعد سب الح ساعة 3 عند استخدام تركيز كذلك، اختبرنا تأثير المستخلصات المائية على تثبيط إنزيمَي ٪ من زيت القسط الهندي العطري. الأميليز والبروتياز في الجهاز الهضمي لـ بتر T. castaneum كيز ا متفاوته 10 من 150 إلى ميكروغرام/مل، فلوحظ وجود علاقة طردية بين ارتفاع من الناحية التركيز وتقليل النشاط الإنزيمي، مما يوحي بأن نمط التثبيط هو تنافُسي. البيوكيميائية والجزيئية، تم تحديد الأنزيمين في مرحلة البلوغ؛ فكان الرقم الهيدروجي ني الأمثل لنشاط الأميليز بين 6 و 7 ، وللبروتياز بين 8 9 و . على الرغم من أن استقرار الحرارة لم يكن عاملا ً حاسمًا، فقد تبين أن الإنزيمين يحتفظان 70 بحوالي ٪ من نشاطهما عند التعرض إلى ظروف قاسية عند الأس الهيدروجيني pH = 2 11 أو pH = لمدة 12 تم أيضًا تضخيم الجينات المرتبطة بالإنزيمين وترجمتها إلى سلسلة بروتينية، ثم أُنشئت الهياكل ثلاثية الأبعاد . ساعة باستخ دام برنامج ( I-Tasser ) ، كما أُجريت محاذاة متعددة للتسلسلات ومقارنات تطورية باستخدام أدوات مثل Clustal Omega و ( MEGA ) Molecular Evolutionary Genetic Analysis ، ما يدعم أهمية هذه النتائج في تطوير مبيدات نباتية تعتمد على مثبّطات الأميليز والبروتياز أو حتى في التوجه نحو زراعة نباتات معدّلة وراثيًا مقاومة للحشرات مستعينة بجينات هذه المثبّطات