غانم، خالد محمدالقرني، صالح محمدالشهري، عبدالله بن ناصر زهير200821390https://drepo.sdl.edu.sa/handle/20.500.14154/481Phenol is hydrocarbon compound highly toxic, carcinogenic, and mutagenic, responsible for the environmental pollution and resists biodegradation. It included in multi-manufactures, like antiseptic and disinfectant, pesticides, paints and others. It spills and discharges to the environment at high concentrations. In the present work, isolation of four microorganisms capable of phenol degradation as sole source of carbon and energy from local polluted regions in Saudi Arabia was conducted. They have the ability of phenol degradation and were purified and identified based on macro morphology, micro-morphology, physiology, and biochemistry, as follows: Aspergillus flavus, Candida tropicalis, Trichosporon cutaneum, and Pseudomonas sp. Efficiency of these isolates to degrade phenol was tested, where A. flavus Showed high potency for phenol degradation (100 %) through 120 h, and according to available literature, this is first time to report the ability of this fungus of phenol degradation, while bacteria recorded same result in same time (120 h), the yeasts C. tropicalis and T. cutaneum recorded 90.2% and 88.8% from phenol degradation through 120 h respectively. The fungus A. flavus was selected for the experiments in this thesis. The nutritional requirements of the fungus which give the highest percentage of phenol degradation were tested in different mineral media. The result showed that medium VI = Mineral Medium Phenol (MMP) was the best, and this was the original medium for fungus isolation (100% phenol degradation through 120 h), while for other media fungus recorded percentage phenol degradation ranged between 82.4 – 90.6 %. The effect of phenol concentration by application eight different concentrations was investigated, where was explicit the fungus could degraded different phenol concentrations in different periods, concentration 100 mgl-1 completed through 72 h, 300 mgl-1 through 96 h, 500 mgl-1 through 120 h, 700 mgl-1 through 240 h, and concentrations 900 and 1000 mgl-1 require incubation period more than 240 h, while concentrations 2000 and at 3000 mgl-1 there was no observed growth, because these concentrations were inhibited to growth of fungus, and this result appeared average phenol degradation at concentration 500 mgl-1 was the highest by 4.166 mg h-1 . Also statistical designs of the multi-factorial experiments, consisted of two serial designs, Plackett-Burman and Box Behnken were applied to optimization cultural conditions to raise the fungus potency for phenol degradation and reduce required time for that. Fungus achieved percentage phenol degradation 100% through 99 h from concentration 500 mgl-1 after application Plackett-Burman design, by that the design was reduced required time to phenol degradation from 120 h to 99 h, and by percentage optimization and raising fungus efficiency 17.5%. And after application Box-Behnken design required time to complete phenol degradation became 97 h instead of 99h, and this means optimization and rising to fungus efficiency 2%, and by that the statistical program was optimized and raised fungus efficiency 20%, and reduced required time to complete phenol degradation from 120h to 97h. The fungus showed high potency and efficiency on phenol degradation as sole source of carbon and energy. These results were applied for the bioremediation of the crude sewage contain phenol concentration 0.7 mgl-1 , obtained from the main track of Makkah sewage especially Al-Haram area, where fungus A. flavus completed phenol degradation with optimized conditions through four hours, and this efficiency proved the ability of this fungus to remove the phenolic compounds pollution from environment.3 الفينول مركب هيدروكربوني عالي السمية مسرطن، ومطفر جيني للبشر ملوث للبيئة و مقاوم للهدم الحيوي يدخل في العديد من الصناعات، مثل المطهرات المبيدات والدهانات و غيرها. وهو يصل ويتسرب إلى البيئة بتركيزات عالية. وقد تم دراسة عزل كائنات حية دقيقة، قادرة على هدم الفينول كمصدر وحيد للكربون والطاقة من مناطق ملوثة محلية في المملكة العربية السعودية. حيث تم عزل أربع ميكروبات جميعها لها القدرة على هدم الفينول نقيت و عرفت معمليا بالاعتماد على الخصائص المزرعية، الفحص الميكروسكوبي، الاختبارات الفسيولوجية و الحيوكيميائية على أنها فطر Aspergillus flavus ، خميرة Candida tropicalis ، خميرة Trichosporon cutaneem . وبكتيريا .Pseudomonas sp.. وقد اختبر كفاءة هذه العزلات في القدرة على هدم الفينول، حيث أظهر الفطر flavas ... كفاءة عالية في هدم الفينول بنسبة %۱۰۰٪ خلال ۱۲۰ ساعة، و حسب المراجع المتاحة لأول مرة تدرس قدرة هذا الفطر على هدم الفينول وتثبت من خلال هذه الرسالة أما البكتيريا فقد سجلت نفس نسبة الهدم في نفس الوقت (۱۲۰ ساعة)، بينما الخمائر C. tropicalis T: cutaneum فقد سجلتا %٩٠٫٣ و %۸۸,۸٪ من هدم الفينول خلال ١٢٠ ساعة على التوالي. وقد تم اختيار فطر lavus . ككائن تجارب في هذه الرسالة. ولمعرفة أفضل المتطلبات الغذائية لقطر A. flavues و التي يعطي عندها أعلى نسبة هدم الفينول، اختبرت ستة بيئات أملاح معدنية مختلفة التركيب من حيث الكم والنوع، فأظهرت النتيجة أفضلية بيئة VI - Mineral (Medium Phenol (MMP ، وهي نفسها التي عزل عليها الفطر لأول مرة وذلك بنسبة هدم ١٠٠٪ من الفينول خلال ۱۲۰ ساعة، أما باقي البيئات المستعملة فقد سجل عندها الفطر نسبة هدم الفينول تتراوح بين ٨٢٤ - ٩٠٦٪ . كم درس تأثير تركيز الفينول بتطبيق ثمانية تركيزات مختلفة، فتبين أن الفطر استطاع هدم الفينول عند التركيزات المختلفة على فترات مختلفة، حيث أن التركيز ۱۰۰ ملجم/ لتر أكمل هدمه خلال ۷۲ ساعة ٣٠٠ ملجم / لتر خلال ٩٦ ساعة ٥٠٠ ملجم/ لتر خلال ۱۲۰ ساعة ٧٠٠ ملجم / لتر خلال ٢٤٠ ساعة و التركيزان ۹۰۰ ۱۰۰۰ ملجم/ لتر يتطلبان وقت تحضين لهدمهما أكثر من ٢٤٠ ساعة، أما التركيزان ۲۰۰۰ و ۳۰۰۰ ملجم/ لتر فلم يحصل عندهما نمو إذ كان لهما تأثيرا قاتلا على الفطر. كما أظهرت النتيجة أن معدل هدم الفينول لكل ساعة عند التركيز ٥٠٠ملجم/ لتر هو الأعلى من بين التركيزات المستخدمة وذلك بمعدل ٤,١٦٦ ملجم / ساعة. وقد طبق نظام إحصائي للتجارب متعددة العوامل، مكون من تصميمين متسلسلين، بلاكيت - برمن و بوكس - بينكين، للوصول لأنسب الظروف المزرعية، للارتقاء بقدرة الفطر على هدم الفينول و إنقاص الوقت اللازم لذلك. حيث حقق الفطر نسبة هدم الفينول ٪۱۰۰ خلال ۹۹ ساعة من تركيز ٥٠٠ ملجم/ لتر بعد تطبيق تصميم بلاكيت - برمن، وبذلك يكون التصميم قد انقص الوقت اللازم لهدم الفينول من ۱۲۰ ساعة إلى ۹۹ ساعة و بنسبة تحسن ورفع لكفاءة فطر ١٧.٥ . وبعد تطبيق تصميم بوكس - بينكين أختصر الوقت اللازم لهدم الفينول بشكل كامل عند نفس التركيز من ۹۹ ساعة إلى ٩٧ ساعة وبنسبة تحسن ورفع الكفاءة الفطر بمقدار %٢ عن التصميم السابق، وبذلك يكون البرنامج الإحصائي قد رفع وحسن كفاءة الفطر بمقدار ۲۰٪ و اختصر الوقت اللازم لهدم الفينول من ۱۲۰ ساعة إلى ٩٧ ساعة و بهذا يكون الفطر قد أظهر قدرة وكفاءة عالية على هدم الفينول كمصدر وحيد للكربون والطاقة. وقد طبقت هذه النتائج في معالجة مياه صرف صحي خام تحتوي على الفينول بتركيز ٠.٧ ملجم/ لتر تم الحصول عليها من المجرى الرئيسي لشبكة الصرف الصحي لمدينة مكة المكرمة وبالتحديد المنطقة المحيطة بالحرم حيث استطاع فطر A flaves . و عند الظروف المحسنة أن يكمل هدم الفينول في مياه الصرف الخام بشكل كامل خلال ٤ ساعات . وهذا يثبت كفاءة وقابلية استخدام فطر التجارب في إزالة التلوث الفينولي من البيئة.160ar-SAThesis