العلاقة بين أنيميا الفول وحالات الملاريا في منطقة جازان المملكة العربية السعودية

Abstract

الخلفية: يُعدّ نقص إنزيم نازعة هيدروجين الغلوكوز-6-فوسفات (G6PD) اضطرابًا وراثيًا يصيب نحو 500 مليون شخص حول العالم، لا سيما في المناطق التي يستوطن فيها مرض الملاريا. وعلى الرغم من أن هذا النقص قد يؤدي إلى حالات انحلال دموي، تشير بعض الدراسات إلى أن المصابين به قد يكونون أقل عرضة للإصابة بالملاريا أو يعانون من أعراض أقل حدة. ومع ذلك، لا تزال آلية هذا التأثير ومدى ارتباطه غير واضحة تمامًا. تهدف هذه الدراسة إلى استقصاء العلاقة بين طفرة G6PD Mediterranean (الرمز rs5030868) وحالات الملاريا غير المعقدة. ولتحقيق ذلك، تم العمل على تحسين تقنية PCR المتعدد (Multiplex PCR) للكشف عن الطفيليات المسببة للملاريا، باستخدام تقنية PCR المتداخل (Nested PCR) كمرجع، إضافة إلى تحديد النمط الجيني لطفرة G6PD Mediterranean باستخدام تقنية Tetra-ARMS PCR وتأكيد النتائج بالتسلسل الجيني (Sequencing). المنهجية: أُجريت هذه الدراسة في مدينة جازان، المملكة العربية السعودية. تم جمع 76 عينة دم 30 من مرضى الملاريا و46 عينة من أشخاص أصحاء لاستخدامها في التحاليل الجزيئية. شُخّصت الملاريا مبدئيًا باستخدام الفحص المجهري، ثم جرى تحسين بروتوكول PCR المتعدد للكشف عن الملاريا، مع استخدام تقنية PCR المتداخل للتحقق من النتائج. كما جرى تحسين بروتوكول T-ARMS PCR للكشف عن طفرة G6PD Mediterranean، وأُجري التسلسل الجيني لتأكيد النتائج. النتائج: أظهرت تقنية PCR المتعدد حساسية عالية بلغت 100% للكشف عن Plasmodium falciparum، و90% للكشف عن Plasmodium vivax. إلا أن إحدى الحالات المشتركة (mixed infection) لم تُكتشف. أما فيما يخص طفرة rs5030868، فقد تم تأكيد حالة واحدة بين المصابين بالملاريا، فيما تم تحديد حالتين بين الأصحاء. الاستنتاج: تم تحسين بروتوكول PCR المتعدد بنجاح وحقق حساسية ونوعية مرتفعة مقارنة بـ PCR المتداخل، مع ملاحظة انخفاض طفيف في حساسية الكشف عن P. vivax في حالات العدوى المختلطة. كما تم تطوير بروتوكول T-ARMS PCR للكشف عن طفرة G6PD Mediterranean rs5030868، ولكن نظراً لصعوبات في التحقق، تم الاعتماد على التسلسل الجيني لتأكيد النتائج. وقد أشارت النتائج إلى وجود الطفرة في مريض واحد مصاب بالملاريا، مقابل حالتين في غير المصابين، ما قد يشير إلى تأثير وقائي محتمل ضد الإصابة بالملاريا غير المعقدة، إلا أن هذا الاختلاف لم يصل إلى دلالة إحصائية بسبب صغر حجم العينة.

الكلمات المفتاحية: الملاريا، PCR المتعدد، PCR المتداخل، طفرة G6PD Mediterranean، T-ARMS PCR، التسلسل الجيني، منطقة جازان.