Phytochemical Analysis and Anti-Inflammatory Activity of Capparis cartilaginea Decne. from Saudi Arabia: An Ethnopharmacological Study

Abstract

الملخص تنتمي Capparis cartilaginea (ك. كارتيلجينا) إلى فصيلة القبار (Capparaceae)، المعروفة باستخداماتها الطبية التقليدية المتعددة. في المملكة العربية السعودية، تُستخدم أوراق وجذور هذا النبات في الطب الشعبي، خصوصًا كمسكن لعلاج حالات مثل الفُصال العظمي، والتهاب المفاصل الروماتويدي، والنقرس، وغالبًا ما يتم تحضيره على هيئة منقوع (شاي). وتشير هذه الاستخدامات التقليدية إلى أن هذا النبات يمتلك خصائص مضادة للالتهاب. ومع ذلك، فإن التحقق العلمي من هذه الأنشطة الدوائية لا يزال محدودًا. وعلى الرغم من وجود عدد من الدراسات التي تناولت التركيب الكيميائي والنشاط الدوائي والسلامة لأنواع مختلفة من Capparis، إلا أن هناك نقصًا ملحوظًا في الأبحاث التي تركز تحديدًا على هذا النوع.

تهدف هذه الدراسة إلى سد هذه الفجوة من خلال دراسة المكونات الكيميائية النباتية لنبات ك. كارتيلجينا بشكل منهجي، وتقييم أنشطتها المضادة للالتهاب، وفهم آليات تأثيرها. تم استخدام الأوراق لتحضير منقوع تقليدي (شاي)، ثم تم تقسيمه باستخدام الفصل السائل-السائل بخلات الإيثيل والبيوتانول. أظهرت المرحلتان العضويتان الناتجتان تشابهًا في التركيب الكيميائي (كما تم تأكيده باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة TLC)، ولذلك تم دمجهما في مستخلص عضوي واحد يُشار إليه طوال الرسالة باسم "المستخلص". خضع كل من الشاي والمستخلص لتحليل كيميائي وتم اختبار نشاطهما المضاد للالتهاب. كما تم عزل مركبات فينولية من المستخلص وتنقيتها باستخدام كروماتوغرافيا الطرد المركزي عالية السرعة (HSCCC) وكروماتوغرافيا الفصل بالحجم الجزيئي، وتحديد تركيبها باستخدام تقنيات طيفية متعددة، شملت الأشعة فوق البنفسجية (UV)، الأشعة تحت الحمراء (IR)، مطياف الكتلة (MS)، والرنين المغناطيسي النووي (NMR) بأبعاده المختلفة. وتم تحديد تركيز هذه المركبات في كل من الشاي والمستخلص باستخدام كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC). كما تم تحليل الزيت الطيار المستخرج من النبات باستخدام تقنية كروماتوغرافيا الغاز-مطياف الكتلة (GC-MS). وتم إجراء تحليل متعدد المتغيرات لمقارنة المكونات الكيميائية لنبات ك. كارتيلجينا مع أنواع أخرى من Capparis، مما ساعد في التصنيف الكيميائي النباتي وتقييم الجودة.

تم تقييم النشاط المضاد للالتهاب باستخدام نموذج مخبري لالتهاب ناتج عن تحفيز بالليبوبوليسكاريد (LPS) في بلاعم فأرية وبشرية. وشمل هذا التقييم تحليل السيتوكينات الالتهابية، وإنتاج أكسيد النيتريك، وإنزيمات الميتالوبروتينييز، بالإضافة إلى تنشيط الإنفلاماسوم NLRP3 باستخدام تقنيات مثل اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، واختبار Griess، والتصوير الهلامي للجيلاتين، والتلطيخ المناعي الغربي، والتلوين المناعي الفلوري.

أسفرت النتائج عن عزل وتحديد سبعة فلافونويدات رئيسية من النبات، بالإضافة إلى حمض الغاليك والأدينوزين. الفلافونويدات المعزولة شملت: كايمبفيرول-3-O-روتينوسيد (نيكوتيفلورين)، كويرسيتين-3-O-روتينوسيد (روتين)، كويرسيتين 3-(2G-رامنوسيلروتينوسيد) (مانغاسلين)، كايمبفيرول 3-(2G-رامنوسيلروتينوسيد) (كليتورين)، كويرسيتين-3-O-نيوهيسبيريدوسيد (Q-neo)، كايمبفيرول-3-O-نيوهيسبيريدوسيد (K-neo)، وإيزورهامنيتين-3-O-روتينوسيد (نارسيسين). تم توصيف هذه المركبات باستخدام تقنيات طيفية مختلفة، كما تم تحديد تركيزها بدقة باستخدام HPLC، حيث ظهر أن الروتين هو المركب السائد في كل من الشاي والمستخلص، بتركيز بلغ 264.75 ± 0.17 و248.75 ± 0.49 ميكروغرام/غرام على التوالي.

أما تحليل الزيت الطيار باستخدام GC-MS فقد كشف عن 41 مركبًا تمثل 99.99٪ من مكونات الزيت، ومن بين المركبات الرئيسية: أيزوبرول أيزوثيوسيانات (31.0٪)، 2-ميثيل بيوتيل نتريل (21.4٪)، 2-بيوتيل أيزوثيوسيانات (18.1٪)، إيزوبيوتيرونيتريل (15.4٪)، و3-ميثيل بيوتيل نتريل (8.2٪). أظهر التحليل الإحصائي المتعدد المتغيرات (PCA وAHC) أن المركبات النتريلية تُعد مكونات بارزة ومميزة في زيت ك. كارتيلجينا، وهو ما لم يُبلغ عنه في أنواع أخرى من Capparis، مما يشير إلى إمكانية اعتبار هذه المركبات علامات تصنيفية كيميائية مميزة لهذا النوع.

أظهرت الاختبارات الحيوية أن الشاي والمستخلص والمركبات المعزولة أظهرت نشاطًا مضادًا للالتهاب تمثل في تقليل ملحوظ لإنتاج MMP-9 والسيتوكينات الالتهابية (IL-6، TNF-α، IL-1β) وأكسيد النيتريك بنسبة وصلت إلى 50–60٪ في البلاعم المحفزة بـ LPS، كما لوحظ تثبيط لتنشيط الإنفلاماسوم NLRP3. كما أظهر الزيت الطيار ومكوناته الرئيسية تأثيرات مشابهة، مما يدعم الاستخدام التقليدي للنبات في علاج الحالات الالتهابية.

خلصت هذه الدراسة إلى التحقق من صحة الاستخدام التقليدي لنبات ك. كارتيلجينا في علاج الالتهابات. تم تحديد سبعة فلافونويدات رئيسية وقياس تركيزها في المستخلص، كما تم تحديد 41 مركبًا في الزيت الطيار، وكان من أبرزها أيزوبرول أيزوثيوسيانات كمؤشر كيميائي تصنيفي محتمل. وأكدت التحاليل الحيوية أن النبات يتمتع بخصائص مضادة للالتهاب ملحوظة. وتدعم هذه النتائج الاستخدامات التقليدية للنبات وتوفر أساسًا علميًا لتطبيقاته العلاجية المحتملة، مما يستدعي إجراء المزيد من الدراسات الحيوانية والتجارب السريرية لتأكيد هذه التأثيرات واستكشاف أهميتها السريرية.